不同疫苗計(jì)量單位的意義與區(qū)別
在獸醫(yī)臨床,我們會(huì)發(fā)現(xiàn)不同類型的疫苗其抗原含量計(jì)量單位有所區(qū)別,比如豬瘟疫苗習(xí)慣用RID計(jì)量,支原體疫苗用CCU計(jì)量,本文我們將不同的計(jì)量單位做說(shuō)明與區(qū)分。
CCU:顏色改變單位,CCU法通常用于很小,用一般的比濁法無(wú)法計(jì)數(shù)的微生物,如支原體等。因?yàn)橹гw的液體培養(yǎng)物是完全透明的,呈現(xiàn)為清亮透紅色,因此無(wú)法用比濁法來(lái)計(jì)數(shù),并且支原體固體培養(yǎng)很困難,用CFU法也不易計(jì)數(shù)。
原理是:支原體在特定的培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)代謝過(guò)程將改變培養(yǎng)基的PH,由于添加了酸堿指示劑的原因,培養(yǎng)基將變色,通過(guò)將菌液倍比稀釋不同濃度,觀察顏色變化,便可得到該支原體菌液的最大代謝活力的稀釋倍數(shù),即為該菌液的CCU。
CFU:菌落形成單位,豬丹毒、副豬等菌苗常用的計(jì)量單位。是指在活菌培養(yǎng)計(jì)數(shù)時(shí),由單個(gè)菌體或聚落成團(tuán)的多個(gè)菌體在固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)繁殖所形成的集落,用來(lái)表達(dá)活菌的數(shù)量。菌落形成單位的計(jì)量方式與一般的計(jì)數(shù)方式不同,一般直接在顯微鏡下計(jì)算細(xì)菌數(shù)量會(huì)將活與死的細(xì)菌全部算入,但是CFU只計(jì)算活的細(xì)菌。因此,通常將菌液倍比稀釋成不同濃度,每種濃度分別培養(yǎng)計(jì)數(shù)后,乘以稀釋倍數(shù),取平均值,從而獲得更高的精準(zhǔn)度。
RID:兔體感染量,感染一只正常兔子所用的劑量。按照能夠引起兔子出現(xiàn)定型熱的最大稀釋倍數(shù),確定為疫苗的抗原含量。由于豬瘟病毒在細(xì)胞上不會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞病變,難以用TCID50測(cè)定。而國(guó)外使用的豬體半數(shù)感染量(PD50),在國(guó)內(nèi)受制于合格實(shí)驗(yàn)豬有限,很難開(kāi)展,所以國(guó)內(nèi)通常使用兔體感染量,來(lái)計(jì)量豬瘟病毒。
TCID50:半數(shù)組織感染劑量,又稱50%組織細(xì)胞感染量,用于計(jì)算病毒。表示能導(dǎo)致50%的培養(yǎng)細(xì)胞發(fā)生病變的病毒量。TCID50所測(cè)的不是病毒顆粒的數(shù)目,而是病毒感染反應(yīng)的有或無(wú),嚴(yán)格來(lái)說(shuō),它是一種定性測(cè)定法。但是因?yàn)楦腥痉磻?yīng)的有或無(wú)與病毒顆粒數(shù)目之間有一定定量關(guān)系,且該法靈敏度高,更為方便,所以廣泛用于病毒的定量測(cè)定。不過(guò)由于實(shí)際操作中是通過(guò)不同倍比稀釋后,統(tǒng)計(jì)接種細(xì)胞出現(xiàn)的病變數(shù)量,再運(yùn)用統(tǒng)計(jì)學(xué)公式計(jì)算得出,所以精準(zhǔn)度略差于PFU(空斑試驗(yàn))。
PFU:空斑形成單位,計(jì)量病毒的一種單位,限用于有產(chǎn)生空斑能力的病毒。與TCID50測(cè)定不同的是,其能更精準(zhǔn)的表示病毒的實(shí)際數(shù)量,兼具定性和定量。
原理是:用少量有破壞宿主細(xì)胞能力的病毒去感染已經(jīng)形成的致密單層狀態(tài)的宿主細(xì)胞群體時(shí),經(jīng)過(guò)一定培養(yǎng)時(shí)間,使每個(gè)感染細(xì)胞周圍的細(xì)胞逐漸感染崩潰,形成肉眼可見(jiàn)的空斑。
理論上,一個(gè)病毒體可以形成一個(gè)空斑,但實(shí)際上有不同程度誤差,因此不能準(zhǔn)確的與其他計(jì)量單位互換,不過(guò)通常0.7PFU約等于1.0TCID50。
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