2015年12月28日，北京檢測(cè)云中心接到河北省天津市某養(yǎng)殖場(chǎng)一例產(chǎn)蛋雞發(fā)病的案例。經(jīng)流行病學(xué)調(diào)查、病理剖檢和實(shí)驗(yàn)室診斷，最后確診為一例禽流感H9混感大腸桿菌的案例。
1、臨床癥狀
160日齡的開產(chǎn)雞群，已免疫3次新流油苗和3次禽流感H5油苗，118日齡免疫新支減流，128天時(shí)四系2飲水，140日齡時(shí)免疫禽流感H5-6、-7油苗。一個(gè)星期前雞群開始出現(xiàn)零星死亡，但雞群整體上無(wú)明顯的精神不振現(xiàn)象，采食量亦無(wú)較大的波動(dòng)，但雞群里總是出現(xiàn)打蔫的雞，出現(xiàn)后不久就死亡。就診前2天每棟5萬(wàn)只的雞舍每天死亡5-6只雞，且死亡量逐漸增加，現(xiàn)在每天死亡20多只雞。大群無(wú)明顯的呼吸道癥狀，但雞群中有個(gè)別雞只拉黃白色糞便。
2、病理剖檢癥狀
剖檢4只病雞可見氣管環(huán)節(jié)淤血；肝臟淤血呈紫色；卵泡嚴(yán)重變形呈菜花狀，嚴(yán)重者萎縮肉變，輸卵管易碎；腺胃、肌胃交界處有出血斑，腺胃乳頭出血；盲腸淋巴結(jié)腫大出血，十二指腸、空腸、回腸淋巴集結(jié)腫大出血，且十二指腸可見明顯的出血斑，直腸出血較來(lái)重。見附圖1。
圖1、剖檢圖片
3、實(shí)驗(yàn)室診斷
根據(jù)臨床癥狀和剖檢癥狀，懷疑雞群可能由新城疫或者禽流感H9混合感染細(xì)菌性疾病引起，因此進(jìn)行以下實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)：
3.1 檢測(cè)新城疫和禽流感抗體水平
160日齡雞群，隨機(jī)采集20枚雞蛋，采用血凝和血抑方法檢測(cè)新城疫、禽流感H9、H5Re-6、H5Re-7抗體水平，具體數(shù)據(jù)見表1。由表可知，新城疫和禽流感抗體水平均在臨界保護(hù)值左右徘徊，抗體水平較均勻。
表1 160日齡新城疫、禽流感抗體水平
3.2 新城疫和禽流感病原檢測(cè)
無(wú)菌采集脾臟、卵巢、盲腸淋巴結(jié)等病變組織，將上述組織研磨進(jìn)行分子生物學(xué)RT-PCR方法檢測(cè)，分別檢測(cè)新城疫和禽流感病毒核酸，結(jié)果顯示禽流感H9N2病原檢測(cè)為陽(yáng)性、新城疫為陰性。如圖2。
圖2 禽流感H9、新城疫病原檢測(cè)結(jié)果
3.3 細(xì)菌分離結(jié)果
無(wú)菌采取肝臟、心臟、脾臟等病料分別劃線接種在麥康凱和SS瓊脂上，37℃培養(yǎng)12h，在麥康凱平板上可見桃紅色圓潤(rùn)突起的菌落，挑取單個(gè)菌落鏡檢，在顯微鏡下觀察為革蘭氏陰性的短小桿菌，判斷為大腸桿菌；大SS瓊脂上可見乳白色的菌落，鏡檢可見革蘭氏陰性的短小桿菌；經(jīng)生化試驗(yàn)判斷此菌為大腸桿菌非沙門氏菌。見圖3。
圖3、細(xì)菌分離結(jié)果
3.4 藥敏試驗(yàn)結(jié)果
無(wú)菌采取肝臟、心臟、脾臟等處病料分別進(jìn)行細(xì)菌分離37℃培養(yǎng)12h，用菌液進(jìn)行藥敏實(shí)驗(yàn)，此菌對(duì)多西環(huán)素、頭孢他啶、硫酸粘菌素、桿菌必克中敏；腸安泰、硫酸新霉素、慶大霉素高敏；硫酸阿米卡星極敏。見附表2。
表2 藥敏試驗(yàn)結(jié)果
4、診斷結(jié)果分析及建議
根據(jù)臨床癥狀、剖檢癥狀和實(shí)驗(yàn)室診斷，最后確診此次雞群發(fā)病是由禽流感H9N2混合感染大腸桿菌引起。治療措施：在飼料中添加清瘟解毒中藥和黃芪多糖成份的藥物，抗病毒和提高機(jī)體的抵抗力，連用5天；同時(shí)水中加入硫酸新霉素每天集中飲用一次，連用5天。對(duì)于大群，每天清兩次糞便，同時(shí)用兩種消毒液每天交替對(duì)舍內(nèi)舍外進(jìn)行消毒，每天1－2次，連續(xù)一個(gè)星期。
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