雞胚感染沙雷氏菌的診斷

　　禽類(lèi)胚胎疾病是由多種因素及病原微生物引起的綜合性疾病，可造成禽胚的發(fā)育受阻，胚胎死亡，孵化率降低等現(xiàn)象，導(dǎo)致養(yǎng)禽業(yè)的重大經(jīng)濟(jì)損失。其又可分為內(nèi)源性感染(由母體直接傳遞病原)和外源性感染(環(huán)境中的微生物侵入蛋內(nèi))。其中最常見(jiàn)細(xì)菌性感染包括了大腸桿菌、沙門(mén)氏菌、波氏桿菌、假單胞菌、變形桿菌以及一些球菌等。

　　最近我們?cè)谝慌蜋z的死亡雞胚中首次分離到一株禽源性粘質(zhì)沙雷氏菌，通過(guò)雞胚的攻毒試驗(yàn)成功復(fù)制出與臨床癥狀一致的病變，證明了其對(duì)雞胚的致病性，同時(shí)為有的放矢地開(kāi)展防治工作，我們?cè)谶M(jìn)行藥敏試驗(yàn)的同時(shí)還對(duì)其可能的感染來(lái)源進(jìn)行了調(diào)查。

　　一　臨診調(diào)查

　　雞胚在孵化過(guò)程中沒(méi)有明顯的死胎率升高現(xiàn)象，死亡主要為落盤(pán)后至出殼的這段時(shí)間，雞胚常常能夠啄開(kāi)殼，但很多最終無(wú)力出殼；能出殼的雞在飼養(yǎng)的頭幾天內(nèi)部分表現(xiàn)為食欲不振、精神萎靡、拉黃白色稀糞，同時(shí)大群中表現(xiàn)最明顯的是張嘴伸頸、呼吸困難并可聽(tīng)到呼吸羅音。

　　二　剖檢變化

　　對(duì)未出殼和出殼后的雞進(jìn)行剖檢發(fā)現(xiàn)，主要的病變集中在氣囊和肺部，氣囊表現(xiàn)為程度不一的混濁和滲出，嚴(yán)重病例能夠見(jiàn)到其表面有黃綠色的干酪樣滲出；肺臟暗紅色，手壓能見(jiàn)到大量的炎性滲出液，嚴(yán)重病例有黃白色壞死點(diǎn)。通過(guò)臨床調(diào)查，發(fā)現(xiàn)病原來(lái)源于種公雞的精液，通過(guò)精液至母雞輸卵管后傳遞至蛋內(nèi)，當(dāng)雞胚進(jìn)行孵化時(shí)在胚體內(nèi)繁殖，但不引起雞胚的死亡。

　　三　實(shí)驗(yàn)室診斷

將發(fā)病死亡雞胚和雛雞的氣囊病科和卵黃囊病科同時(shí)接種普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂、麥康凱營(yíng)養(yǎng)瓊脂和雞鮮血營(yíng)養(yǎng)瓊脂，37℃培養(yǎng)24小時(shí)同時(shí)進(jìn)行支原體的增菌和培養(yǎng)試驗(yàn)。24小時(shí)后能夠在普通培養(yǎng)皿上看到1~2mm大小的菌落(圖1)，呈灰白色半透明，表面光滑，能在麥康凱上生長(zhǎng)，不發(fā)酵乳糖，菌落呈灰白色，菌落較普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂小。在雞鮮血瓊脂培養(yǎng)基上沒(méi)有溶血環(huán)出現(xiàn)。美蘭染色呈球狀及球桿狀，革蘭氏染色為陰性，多接近球狀的小桿菌(圖2)。同時(shí)進(jìn)行的支原體培養(yǎng)為陰性。

　　生化試驗(yàn)：分離菌能發(fā)酵葡萄糖、麥芽糖、甘露糖、蔗糖、纖維二糖、半乳糖、覃糖、果糖、山梨醇、七葉苷、水楊苷，但不產(chǎn)氣；不發(fā)酵乳糖、木糖、棉籽糖、阿拉伯糖，衛(wèi)矛糖、松二糖；VP、賴(lài)氨酸脫羧酶、鳥(niǎo)氨酸脫羧酶反應(yīng)陽(yáng)性；H2S、尿酶、苯丙氨酸脫氯酶反應(yīng)陰性。

　　通過(guò)上述實(shí)驗(yàn)證明分離菌為粘質(zhì)沙雷氏菌。

　　四　藥敏試驗(yàn)

　　采用常規(guī)藥敏紙片法對(duì)分離菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，結(jié)果該菌對(duì)環(huán)丙沙星、左旋氧氟、氟苯尼考高度敏感，對(duì)新霉素、丁胺卡那霉素中敏，對(duì)頭孢拉定、頭孢噻呋鈉等不敏感。

　　五　病因調(diào)查及防治措施

　　1　通過(guò)臨診調(diào)查，發(fā)現(xiàn)病菌來(lái)源于種公雞的精液，通過(guò)精液至母雞輸卵管后傳遞至蛋內(nèi)，當(dāng)雞胚進(jìn)行孵化時(shí)在胚體內(nèi)繁殖，但不引起雞胚的死亡。

　　2　將分離菌株通過(guò)卵黃囊接種10日齡雞胚，雞胚未發(fā)生死亡，直至出殼，表現(xiàn)為能琢殼但無(wú)力出殼，同時(shí)對(duì)其剖檢能夠看到與臨診一致的雞胚病變，從氣囊和卵黃囊中再次分離到該菌。

　　3　粘質(zhì)沙雷氏菌長(zhǎng)期被認(rèn)為是水和土壤中的常居菌群，近年來(lái)才發(fā)現(xiàn)其可致人體感染，包括泌尿道、呼吸道、腦膜和傷口感染，可引起菌血癥、內(nèi)毒素休克和心內(nèi)膜炎。在家禽中的感染報(bào)道不是很多。有報(bào)道從土壤或水中分離到的粘質(zhì)沙雷氏菌在有氧，特別是在20℃培養(yǎng)時(shí)會(huì)產(chǎn)生一種不擴(kuò)散的紅色色素靈菌紅素，但臨診分離菌株大部分不產(chǎn)色素，我們從禽源分離到的該菌株也未產(chǎn)生色素。

　　4　預(yù)防措施為應(yīng)對(duì)雞群進(jìn)行藥物凈化，注射氟苯尼考或大群用環(huán)丙沙星飲水，進(jìn)行2～3個(gè)療程，同時(shí)對(duì)種公雞的精液進(jìn)行無(wú)菌檢驗(yàn)，淘汰帶菌雞。

　　5　由于該菌對(duì)頭孢噻夫鈉存在相當(dāng)強(qiáng)的抗藥性，所以在雛雞出殼后改變以往注射該藥的規(guī)程，改換環(huán)丙沙星或氟苯尼考，同時(shí)飲水補(bǔ)充電解多維，加強(qiáng)營(yíng)養(yǎng)吸收，減少應(yīng)激。