替米考星的藥理與獸醫(yī)臨床應(yīng)用

　　1、抑制細(xì)菌蛋白質(zhì)的合成

　　與其它的大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)藥物相同，替米考星主要通過(guò)抑制細(xì)菌蛋白質(zhì)合成而起作用。通過(guò)與50S核糖體亞單位可逆性結(jié)合,抑制移位酶活性,影響核糖體的位移過(guò)程,阻礙肽鏈的延長(zhǎng)和蛋白質(zhì)的合成,屬于生長(zhǎng)期抑菌劑。當(dāng)藥物濃度為最小抑菌濃度的4倍以上時(shí)，替米考星具有殺菌作用。

　　2、與機(jī)體免疫系統(tǒng)協(xié)同作用

　　科學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，替米考星可通過(guò)以下三種途徑與機(jī)體的自然免疫系統(tǒng)協(xié)同作用，強(qiáng)強(qiáng)聯(lián)合。(1) 在吞噬細(xì)胞中靶向聚集;(2)伴隨吞噬細(xì)胞向感染部位趨化性轉(zhuǎn)移;(3)替米考星從吞噬細(xì)胞中釋放后殺菌。

　　替米考星在體內(nèi)的生物學(xué)分布具有高度的靶向聚集性。研究發(fā)現(xiàn)：替米考星在肺臟中的濃度是血清中濃度的10倍以上，在嗜中性粒細(xì)胞中的濃度是血清中濃度的40倍以上;在巨噬細(xì)胞內(nèi)的濃度是細(xì)胞外濃度的50～75倍。Scorneaux 等學(xué)者發(fā)現(xiàn)體內(nèi)51%～85%的替米考星可靶向聚集于巨噬細(xì)胞的溶酶體中。也就是說(shuō)，當(dāng)替米考星進(jìn)入體內(nèi)后，會(huì)迅速聚集于肺部，特別是肺部的巨噬細(xì)胞內(nèi)。替米考星的靶向聚集性可能與pH值有關(guān)，其分子結(jié)構(gòu)中有兩個(gè)堿性的氨基基團(tuán)，使其容易在酸性的巨噬細(xì)胞溶酶體中聚集。

　　聚集于肺泡巨噬細(xì)胞的替米考星可與巨噬細(xì)胞協(xié)同作用。在正常狀態(tài)下,肺泡巨噬細(xì)胞將細(xì)菌、支原體等吞噬后形成吞噬小體,然后與溶酶體融合，依靠溶酶體中的溶菌酶消滅病原體，但此機(jī)制常無(wú)法將全部病原殺滅。當(dāng)替米考星存在時(shí)，吞噬小體與溶酶體融合后，病原體將在溶菌酶與替米考星的抗菌性的“雙重所用”下被消滅，殺菌作用顯著增強(qiáng)。替米考星不但可在豬巨噬細(xì)胞內(nèi)聚集，還能在其內(nèi)維持一定的時(shí)間，體外研究表明，當(dāng)細(xì)胞外的替米考星已代謝完畢時(shí)，嗜中性粒細(xì)胞與巨噬細(xì)胞中的替米考星最少還能維持4小時(shí)。這也就意味著，在血清中的替米考星代謝完畢后，吞噬細(xì)胞內(nèi)仍可存在有效濃度的替米考星，并對(duì)病原菌起作用。這可能是替米考星抗菌后效應(yīng)的原因之一。Scorneaux等人還發(fā)現(xiàn)，替米考星還能增強(qiáng)巨噬細(xì)胞溶菌酶的產(chǎn)生量，從而增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的殺菌能力。

　　此外，替米考星可能會(huì)影響病原體對(duì)細(xì)胞的黏附作用。Thacker等人證實(shí)，高濃度的替米考星(2ug/L)能夠抑制肺炎支原體對(duì)纖毛上皮細(xì)胞的粘附作用，但具體的機(jī)理尚未被完全清楚。

　　3、誘導(dǎo)嗜中性粒細(xì)胞凋亡與抗炎特性

　　目前已有多項(xiàng)研究表明：替米考星具有抗炎作用。體內(nèi)研究表明替米考星能夠誘導(dǎo)感染支原體的牛肺臟嗜中性粒細(xì)胞發(fā)生凋亡，從而具有抗炎效應(yīng)。這種效應(yīng)與支氣管肺泡灌洗液中的促炎性因子B4(LTB4)的減少有關(guān)。體外試驗(yàn)表明，無(wú)論是否有細(xì)菌的存在，替米考星都能誘導(dǎo)嗜中性粒細(xì)胞發(fā)生凋亡，在同樣的試驗(yàn)條件下，其它抗生素如：青霉素、頭孢噻呋、土霉素等均無(wú)誘導(dǎo)嗜中性粒細(xì)胞凋亡的特性。另外一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)[14]，替米考星也可以誘導(dǎo)感染傳染性胸膜肺炎的豬產(chǎn)生促進(jìn)細(xì)胞凋亡及抗炎的效果。圖2中大體描述了替米考星的此項(xiàng)特性，但其具體的作用機(jī)理有待進(jìn)一步的研究。

　　4、替米考星的抗菌后效應(yīng)

　　目前已有多項(xiàng)體外試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)：替米考星對(duì)巴氏桿菌、胸膜肺炎放線桿菌、鏈球菌等具有顯著的抗菌后效應(yīng)。且替米靠性考星的抗菌后效應(yīng)比泰樂(lè)菌素與阿普拉霉素要強(qiáng)，當(dāng)以8倍于MIC的替米考星作用于巴氏桿菌與胸膜肺炎放線桿菌時(shí)，替米考星的抗菌后效應(yīng)可長(zhǎng)達(dá)8小時(shí)。

　　圖中替米考星誘導(dǎo)嗜中性粒細(xì)胞凋亡(程序性細(xì)胞死亡：PCD)，減少嗜中性粒細(xì)胞壞亡所造成的組織破壞，具有抗炎特性。

　　5、替米考星對(duì)藍(lán)耳病毒復(fù)制的影響

　　替米考星可靶向聚集于肺泡巨噬細(xì)胞，而肺泡巨噬細(xì)胞也是藍(lán)耳病毒的主要宿主細(xì)胞。多項(xiàng)研究表明：替米考星對(duì)藍(lán)耳病病毒的復(fù)制具有抑制作用。Yijun Du等人發(fā)現(xiàn)替米考星可抑制豬肺泡巨噬細(xì)胞中的1型與2型藍(lán)耳病毒復(fù)制。使1型藍(lán)耳病毒的復(fù)制降低為1/43,而2型藍(lán)耳病毒的復(fù)制降低為1/14,替米考星對(duì)1型藍(lán)耳病毒的作用更強(qiáng)。

　　Molitor等人發(fā)現(xiàn)：替米考星可劑量依賴性的抑制藍(lán)耳病毒的復(fù)制。替米考星單獨(dú)作用于藍(lán)耳病毒時(shí)，對(duì)藍(lán)耳病病毒的活性沒(méi)有任何影響，但肺泡巨噬細(xì)胞與替米考星先作用后，再接種藍(lán)耳病病毒時(shí)，藍(lán)耳病病毒的復(fù)制將被影響，且具有劑量依賴性。

　　研究還證實(shí),當(dāng)豬繁殖與呼吸綜合征病毒和豬2型圓環(huán)病毒同時(shí)感染時(shí)能減少豬體內(nèi)巨噬細(xì)胞的數(shù)量,同時(shí)降低其免疫功能,而這時(shí)投給替米考星,則會(huì)協(xié)助巨噬細(xì)胞使其免疫功能接近正常。

　　上述體外試驗(yàn)均證明：替米考星可能被用于藍(lán)耳病的預(yù)防或早期防控。

　　6、替米考星對(duì)繼發(fā)性肺炎的作用

　　(1)副豬嗜血桿菌病

　　目前多個(gè)國(guó)家將替米考星預(yù)混劑注冊(cè)用于副豬嗜血桿菌的防控與治療。2007年10月美國(guó)禮來(lái)公司的泰勇®(20%的磷酸鹽替米考星)在加拿大成功注冊(cè)用于副豬嗜血桿菌的控制，而至今依然是加拿大唯一一種被批準(zhǔn)用于副豬嗜血桿菌控制的飼料預(yù)混劑。

　　體外抑菌試驗(yàn)證明：替米考星對(duì)副豬嗜血桿菌的最小抑菌濃度≤1 mg/mL,對(duì)中國(guó)本地分離的110株副豬嗜血桿菌100%敏感。MacInnes等人[23]對(duì)藍(lán)耳陽(yáng)性穩(wěn)定的保育豬群(23～26日齡)，人工氣霧感染5型副豬嗜血桿菌，攻毒8天后，未加藥組100%(25/25)出現(xiàn)典型副豬臨床癥狀或死亡，而攻毒前1周添加200g/T飼料替米考星組僅有48%(13/27)出現(xiàn)臨床癥狀，添加400g/T飼料替米考星組僅有15%(4/27)出現(xiàn)臨床癥狀，飼料中添加替米考星顯著降低了保育豬副豬嗜血桿菌的感染。

　　(2)傳染性胸膜肺炎

　　我國(guó)已經(jīng)注冊(cè)批準(zhǔn)將替米考星用于傳染性胸膜肺炎的防控。體外試驗(yàn)證實(shí)：替米考星對(duì)胸膜肺炎放線桿菌的最小抑菌濃度為8 mg/mL，胸膜肺炎放線桿菌對(duì)替米考星敏感。G Hoflack等人對(duì)比了的替米考星(400 mg/kg 飼料，拌料使用)與長(zhǎng)效土霉素(20 mg/kg體重，肌肉注射)在治療臨床發(fā)病的傳染性胸膜肺炎時(shí)的效果發(fā)現(xiàn)：與長(zhǎng)效土霉素相比，替米考星組的新增病例顯著減少，豬只日增重與料肉比均有顯著的改善，治療效果優(yōu)于注射土霉素。G.S. Allison等人報(bào)道，對(duì)生長(zhǎng)育肥豬全群使用300 mg/kg飼料的替米考星可凈化豬群的傳染性胸膜肺炎。但N. Fittipaldi等人發(fā)現(xiàn)，對(duì)傳染性胸膜肺炎陽(yáng)性的豬群以400 mg/kg飼料的劑量連續(xù)添加替米考星(泰勇®)30天，可使扁桃體表面的沖洗液達(dá)到胸膜肺炎放線桿菌PCR檢測(cè)陰性，但無(wú)法確保扁桃體深層組織內(nèi)也是APPPCR檢測(cè)陰性。是否能夠使用替米考星作傳染性胸膜肺炎的全群凈化尚需要進(jìn)一步的研究。

　　(3)支原體肺炎

　　因肺炎支原體的分離培養(yǎng)較困難，關(guān)于替米考星對(duì)肺炎支原體的體外最小抑菌濃度的研究也相對(duì)較少。J. Vicca等人試驗(yàn)，替米考星對(duì)肺炎支原體的最小抑菌濃度為0.25~0.5mg/L,其對(duì)臨床分離的21株肺炎支原體，僅1株表現(xiàn)為耐藥，而恩諾沙星對(duì)這21株肺炎支原體耐藥較嚴(yán)重，說(shuō)明替米考星對(duì)肺炎支原體尚未出現(xiàn)耐藥性的擔(dān)憂。

　　(4)其它細(xì)菌性肺炎

　　體內(nèi)外的試驗(yàn)表明：替米考星對(duì)巴氏桿菌的效果確實(shí)(MIC90≤ 6.25 μg/mL)，而對(duì)豬鏈球菌(MIC90>128 mg/ml)與敗血型沙門(mén)氏菌的效果不佳。Henk報(bào)道，替米考星對(duì)鏈球菌是否敏感性與鏈球菌的血清型相關(guān)。因而對(duì)于混發(fā)有豬鏈球菌或敗血型沙門(mén)氏菌的病例，在選用替米考星時(shí)需要謹(jǐn)慎或與其它敏感藥物配伍使用。

　　7、替米考星在藍(lán)耳病防控上的應(yīng)用

　　研究已表明替米考星在抑制藍(lán)耳病毒復(fù)制的同時(shí)并不會(huì)影響豬只針對(duì)藍(lán)耳病毒的抗體反應(yīng)。在藍(lán)耳病爆發(fā)后投喂替米考星，一方面可以防止繼發(fā)性細(xì)菌性肺炎，另一方面可以抑制藍(lán)耳病毒的復(fù)制，緩解臨床癥狀。目前已有很多篇關(guān)于替米考星用于后備母豬、懷孕母豬及保育仔豬進(jìn)行藍(lán)耳病防控的報(bào)道。

　　(1)在后備母豬藍(lán)耳病防控上的應(yīng)用

　　替米考星用于隔離檢疫階段的后備豬群，可降低PRRS病毒同群感染的風(fēng)險(xiǎn)。丹麥學(xué)者Elvstroem等人報(bào)道[30]，丹麥某豬場(chǎng)對(duì)引進(jìn)的12周齡的藍(lán)耳病陰性的后備母豬在隔離檢疫欄全群同期自然感染PRRS病毒，并同時(shí)使用替米考星(泰勇®，美國(guó)禮來(lái)公司)200mg/kg飼料連續(xù)用藥7天，以控制臨床癥狀，但豬群同時(shí)建立對(duì)PRRS的免疫力。確保后備母豬在配種前藍(lán)耳呈陽(yáng)性穩(wěn)定狀態(tài)。6個(gè)月后，該群所產(chǎn)仔豬具有藍(lán)耳病母源抗體，但不攜帶藍(lán)耳病毒。斷奶仔豬的死亡率降至1.8%,而平均日增重升至505g。

　　(2)在基礎(chǔ)母豬藍(lán)耳病防控上的應(yīng)用

　　在爆發(fā)藍(lán)耳病的母豬群，聯(lián)合使用藍(lán)耳病毒陽(yáng)性血清注射與替米考星給藥的策略。加拿大獸醫(yī)學(xué)者M(jìn) Misener等人報(bào)道，在一個(gè)1690頭母豬的豬場(chǎng)爆發(fā)藍(lán)耳病后，母豬群按照10 mg/kg體重連續(xù)使用替米考星14天，給藥4天后，用1:50稀釋的藍(lán)耳病毒陽(yáng)性血清注射感染。結(jié)果表明，未干預(yù)組母豬流產(chǎn)率為33.5%,死亡率10.9%;而干預(yù)組流產(chǎn)率為4.8%，死亡率為0.5%。此方案的投入產(chǎn)出比為1:4.4。

　　(3) 在保育豬藍(lán)耳病防控上的應(yīng)用

　　替米考星對(duì)爆發(fā)藍(lán)耳病的保育豬的治療與干預(yù)效果也得到了實(shí)踐證實(shí)。Molitor等人發(fā)現(xiàn)飼料中添加400mg/kg的替米考星可改善藍(lán)耳病所致的保育豬的淋巴結(jié)腫大、肺脹損傷及病毒血癥等。美國(guó)學(xué)者David等人利用400mg/kg的替米考星拌料治療人工感染藍(lán)耳病的保育豬，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：與未給藥感染組相比，給藥感染組的肺組織與血清樣本的病毒陽(yáng)性率較低，血清中病毒的滴度也顯著的降低(P<0.05)，臨床癥狀與體增重均有所改善。

　　從2004～2008年, Zvonimir等人對(duì)加拿大規(guī)模化豬場(chǎng)藍(lán)耳病爆發(fā)后所采取的防控策略進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)分析：a.對(duì)發(fā)病個(gè)體或豬群進(jìn)行治療以減緩臨床癥狀，使藍(lán)耳病在豬群自然發(fā)展并轉(zhuǎn)歸(占28%);b.采用商品化疫苗對(duì)全群進(jìn)行緊急免疫(占8%)或利用康復(fù)豬只的自然野毒對(duì)母豬群進(jìn)行同群感染(占24%);c.在藍(lán)耳病爆發(fā)后立即利用替米考星(美國(guó)禮來(lái)公司,泰勇®預(yù)混劑)全群給藥四周，同時(shí)采用(占12%)或不采用(占28%)藍(lán)耳病毒進(jìn)行全群感染。由此可知,在加拿大藍(lán)耳病爆發(fā)時(shí),有40%豬場(chǎng)會(huì)采用替米考星進(jìn)行干預(yù)。此外, Zvonimir等人還從2004年～2010年間對(duì)這三種藍(lán)耳病爆發(fā)時(shí)的干預(yù)措施作了為期6年的經(jīng)濟(jì)效益分析。結(jié)果表明：與未采取任何干預(yù)措施的豬場(chǎng)相比，使用藍(lán)耳病毒全群同期感染的豬場(chǎng)平均每頭母豬的收益多20加元。而在藍(lán)耳病爆發(fā)后立即向妊娠母豬飼料中添加替米考星(泰勇®預(yù)混劑)的豬場(chǎng)每頭母豬平均收益多55加元。說(shuō)明在藍(lán)耳病爆發(fā)時(shí)，利用替米考星干預(yù)方案是高投入高產(chǎn)出的。

　　8、總結(jié)

　　因替米考星對(duì)呼吸系統(tǒng)的多種病原具有良好的效果，其已經(jīng)廣泛的應(yīng)用于豬呼吸系統(tǒng)綜合征(PRDC)的防控，但在現(xiàn)場(chǎng)使用時(shí)也存在一些誤區(qū)。首先，替米考星對(duì)呼吸系統(tǒng)的大部分病原菌是敏感的，但其也不是萬(wàn)能的，如：其對(duì)沙門(mén)氏菌、鏈球菌的效果相對(duì)較弱，良好的防控效果建立在正確的診斷之上，選擇正確的藥物進(jìn)行配伍使用;其次，農(nóng)業(yè)部注冊(cè)的替米考星的使用劑量為200～400mg/kg飼料，連續(xù)使用7～14天。但很多規(guī)模化豬場(chǎng)正在低劑量(比如：50mg/kg或100mg/kg飼料)使用替米考星用于疫病的防控，會(huì)促進(jìn)替米考星耐藥性的產(chǎn)生;再次，替米考星的注射劑對(duì)豬只具有潛在的腎毒性，但我國(guó)目前很多豬場(chǎng)正在使用替米考星注射液。最后，替米考星的適口性問(wèn)題。目前國(guó)內(nèi)外已有多家替米考星制劑上市，但絕大多數(shù)為粉劑，苦味過(guò)重，無(wú)法按藥典上推薦劑量(200～400g/噸飼料，按照替米考星有效物質(zhì)計(jì)算)使用，嚴(yán)重影響豬只的采食量。