禽流感滅活疫苗（H9）不同免疫途徑免疫效果的比較

　　作者：國林　趙全興　李梅　馬建平　楊欣欣　汪冉　刁有祥

　　前言：禽流感(Avian Influenza，AI)病。禽類感染后表現(xiàn)為呼吸道癥狀、食欲減少、急性高度致死性。自1878年AI首次在意大利流行以來，蔓延迅速，世界大部分國家和地區(qū)均相繼有AI發(fā)生的記錄和報道，每一次嚴重暴發(fā)都給養(yǎng)禽業(yè)造成巨大的經(jīng)濟損失。禽流感沒有特效的藥物治療，因此疫苗免疫是控制本病最有效的方法。本文探討禽流感滅活疫苗不同接種部位的防疫效果，篩選最佳的防疫途徑，以期指導生產(chǎn)實踐。

　　一　材料與方法

　　1　試驗動物

　　1日齡健康海蘭褐蛋雞，購于泰安東岳種禽有限公司。

　　2　試驗材料

　　96孔V型微量反應(yīng)板、移液器、生理鹽水、1％雞紅細胞懸液。禽流感H9亞型血凝抑制試驗抗原由中國科學院提供；禽流感滅活疫苗(H9亞型)購于乾元浩生物股份有限公司。

　　3　試驗動物的赴理

　　600只健康海蘭褐蛋雞根據(jù)不同免疫途徑隨機分為A、B、C、D、E五組，每組120只。A組為空白對照、B組為頸部皮下注射、C組為胸部肌肉注射、D組為翅根部肌肉注射、E組為腿部肌肉注射。在45曰齡、95日齡分別注射禽流感滅活疫苗(H9)0.5mL。試驗在相同的環(huán)境下，采用同種飼料進行飼喂，同一免疫程序(表1)進行免疫預(yù)防，每隔3天隨機選取15只雞翅靜脈采血，分離血清，根據(jù)HI法撿測雞的抗體水平，根據(jù)平均值繪制抗體消減曲線。

　　4　抗體水平檢測

　　栗用血凝(HA)與血凝抑制試驗(HI)(《高致病性禽流感診斷技術(shù)》中華人民共和國國家標準GB/T 18936-2003)。

　　二　結(jié)果

　　不同防疫部位下禽流感(H9)抗體滴度見圖1，

　　45日齡免疫禽流感H9亞型疫苗后，D組(翅根部肌肉注射)抗體上升速度最快，57目齡達到階段性最高值，為8.2 log2，B組(頸部皮下注射)上升速度最慢，這主要因為肌肉注射，吸收速度比皮下注射快，產(chǎn)生抗體也較快，而皮下注射疫苗吸收緩慢而均勻，產(chǎn)生抗體比較慢；5772日齡，B、C、D、E組抗體水平基本一致，抗體曲線變化相吻合且抗體水平一直維持在61og2以上；72目齡以后，E組(腿部肌肉注射)抗體滴度平均值最高，且E組抗體滴度較其他組高0.5～2.0個滴度，B、C、D組抗體水平比較穩(wěn)定，均勻度也較好。

　　三　討論

　　通過45日齡、95目齡兩次禽流感滅活疫苗的免疫，由H9亞型抗體變化曲線可清楚看出腿肌注射效果最好，抗體滴度比頸部皮下、胸部肌肉、翅根部肌肉三種注射方式高；而頸部皮下、胸部肌肉、翅根部肌肉三種注射方式免疫效果基本一致。

　　綜合分析整個試驗，腿部肌肉注射：禽流感滅活疫苗(H9N2亞型)；頸部皮下注射：禽流感二價滅活疫苗(H5+H9)、重組禽流感病毒H5亞型二價滅活疫苗(HBNl，Re-4+Re-5株)、禽流感滅活疫苗(H9N2亞型)；胸肌注射：禽流感滅活疫苗(H9N2亞型)、傳染性法氏囊炎卵黃抗體；翅根部肌肉注射：重組禽流感病毒H5亞型二價滅活疫苗(H5Nl，Re-4十Re-5株)、禽流感滅活疫苗(H9N2亞型)。由此可看出：除腿部肌肉外，其它防疫部位均注射兩種以上疫苗，而且每個部位吸收疫苗是有限的，防疫頻繁、疫苗劑量過大均會影響疫苗的吸收效果。這就提醒我們在實際操作中，要熟練掌握各種防疫手法，不能因為省時省力而每次都注射在同一部位，不利于疫苗的吸收，從而影響免疫效果。

　　整個蛋雞的飼養(yǎng)過程中，疫苗免疫需作統(tǒng)籌的安排，盡量不要短期內(nèi)同一部位重復注射；同～部位油苗的注射應(yīng)低于3次。